ERRβ CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424021

개요

에스트로겐 관련 수용체 베타(ERRβ)는 생쥐 Esrrb 유전자에 의해 암호화되는 고아(리간드가 알려지지 않은) 핵 수용체로, 에너지 대사, 미토콘드리아 기능, 그리고 세포 운명 결정에 관여하는 유전자 프로그램을 조율하는 전사인자로 작용한다. 다능성 세포에서 Esrrb는 자기재생(self-renewal) 유지에 기여하며, 분화와 계통(lineage) 결정을 조절하는 핵심 전사 네트워크와 상호작용한다. ERRβ의 활성은 스테로이드 호르몬 수용체 신호전달과 연관되어 있고, 산화 경로 및 발달 경로에 대한 보다 광범위한 전사 조절과도 연결된다. Esrrb 의존적 전사의 조절 이상은 발달 결과의 변화와, 맥락에 따라 달라지는 세포 증식 및 대사 상태의 변화와 연관된 것으로 보고되어 왔으며, 이는 질환 관련 모델에서 ERRβ/Esrrb를 기전적 핵심 노드로 활용할 수 있음을 뒷받침한다.

ERRβ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Esrrb 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Esrrb 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Esrrb의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ERRβ 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ERRβ 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Esrrb 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ERRβ 기능에 중요한 Esrrb 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Esrrb 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ERRβ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ERRβ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Esrrb 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ERRβ HDR 플라스미드 (m) 및 ERRβ HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Esrrb 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Esrrb 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.