Plasmide Double Nickase (m) ERMAP: sc-424173-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ERMAP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ERMAP Double Nickase (m) et le plasmide ERMAP Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ermap. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ERMAP Antibody (YS-6): sc-81790
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ERMAP | sc-424173-NIC | 20 µg | $410.00 |
Ermap code la protéine membranaire associée aux érythroblastes (ERMAP), une glycoprotéine membranaire de la superfamille des immunoglobulines, particulièrement enrichie dans les cellules de la lignée érythroïde. Chez la souris, ERMAP contribue à l’organisation de la membrane des érythrocytes et participe aux processus de reconnaissance cellule–cellule via ses domaines extracellulaires de type Ig, soutenant la maturation érythroïde et l’homéostasie des globules rouges. ERMAP est liée à la biologie des antigènes de groupe sanguin et est utilisée comme marqueur pour étudier l’érythropoïèse, la stabilité membranaire et les interactions immunitaires médiées dans les tissus hématopoïétiques. La dérégulation des protéines membranaires érythroïdes, y compris des complexes associés à ERMAP, est pertinente dans les modèles d’anémie et d’altération de l’adhérence ou de la clairance des globules rouges.
ERMAP Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ermap dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ermap. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ermap. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ermap.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.