Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ErbB4/HER4 (h): sc-400275
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ErbB4/HER4 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ErbB4/HER4, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ErbB4/HER4 Antibody (C-7): sc-8050
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ErbB4/HER4 (h) | sc-400275 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
ERBB4 code pour le récepteur tyrosine kinase ErbB4/HER4, un membre de la famille EGFR/ErbB qui transmet les signaux en aval des neurégulines et d’autres ligands. Après dimérisation induite par le ligand et autophosphorylation, ErbB4 active les voies MAPK/ERK, PI3K–AKT, JAK/STAT et PLCγ afin de réguler des décisions du destin cellulaire, notamment la prolifération, la différenciation, la migration et la survie. L’activité d’ERBB4 est également liée à l’endocytose du récepteur et à un processing protéolytique pouvant moduler les signaux nucléaires dans certains contextes cellulaires. Une signalisation ERBB4 dérégulée, ainsi que des altérations d’expression ou d’utilisation des isoformes, ont été associées à des réseaux de signalisation oncogéniques et à des phénotypes pertinents pour la maladie en biologie épithéliale, neuronale et cardiaque.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ErbB4/HER4 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène ERBB4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du ERBB4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert ERBB4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ErbB4/HER4.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en ERBB4 pour l'étude de la signalisation de ErbB4/HER4, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de ERBB4 essentiels à la fonction de ErbB4/HER4
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de ERBB4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ErbB4/HER4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le ErbB4/HER4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus ERBB4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ErbB4/HER4 plasmide HDR (h) et le ErbB4/HER4 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie ERBB4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles ERBB4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.