Plásmido Doble Nickase (h) ER71: sc-404462-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ER71 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ER71 (h) y el plásmido de doble nickasa ER71 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ETV2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ER71 | sc-404462-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ER71 | sc-404462-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El ETV2 humano codifica el factor de transcripción ETS ER71, un regulador maestro de la especificación de los linajes vascular y hematopoyético durante el desarrollo temprano. ER71 se une a motivos ETS para activar programas génicos endoteliales, impulsando procesos como la vasculogénesis, la gemación angiogénica y las transiciones de endotelio a hematopoyético a través de vías que interactúan con la señalización VEGF/VEGFR y con redes transcripcionales más amplias que controlan la identidad vascular. La actividad desregulada de ETV2/ER71 se ha asociado con fenotipos de diferenciación endotelial anómala y de remodelado vascular, lo que la hace relevante para estudios de biología del desarrollo, vascularización tisular y angiogénesis asociada a tumores. Dado que ER71 se sitúa cerca de la cima de las jerarquías transcripcionales endoteliales, perturbar ETV2 proporciona un punto de entrada directo para cartografiar redes génicas downstream y decisiones de linaje.
ER71 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ETV2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ETV2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ETV2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ETV2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.