Plasmide CRISPR/Cas9 KO Epiregulin (m): sc-420224
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Epiregulin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Epiregulin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Epiregulin Antibody (C-9): sc-376284
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Epiregulin (m) | sc-420224 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin **Ereg** code l’épireguline, un membre sécrété de la famille de l’EGF qui interagit avec les récepteurs **EGFR/ERBB** afin de moduler la signalisation paracrine et autocrine. L’épireguline régule la prolifération, la survie et la migration des cellules épithéliales et stromales, en s’intégrant à l’activité des voies **MAPK/ERK** et **PI3K/AKT** et en influençant les programmes de réparation des plaies et de remodelage tissulaire. L’expression d’**Ereg** répond aux signaux d’inflammation et de lésion et est fréquemment étudiée dans des contextes où la signalisation du réseau EGFR croise des microenvironnements pilotés par les cytokines. Une signalisation de l’épireguline dérégulée a été associée à des altérations de la fonction barrière, à un remodelage fibrotique et à des circuits de signalisation oncogéniques, ce qui en fait un nœud mécanistique pertinent pour l’étude des interactions tumeur–stroma et de la signalisation des facteurs de croissance liée à l’inflammation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Epiregulin (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ereg dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ereg, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ereg à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Epiregulin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ereg pour l'étude de la signalisation de Epiregulin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ereg essentiels à la fonction de Epiregulin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ereg pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Epiregulin plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Epiregulin plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ereg. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Epiregulin plasmide HDR (m) et le Epiregulin (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ereg pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ereg définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.