EphA7 Lentiviral Activation Particles (h2): sc-401722-LAC-2

Das humane Gen EPHA7 kodiert die Rezeptor-Tyrosinkinase EphA7, einen membrangebundenen Ephrin-Rezeptor, der kontaktabhängige Signalübertragung vermittelt und während der Entwicklung die Zellpositionierung, Axonführung und die Ausbildung von Gewebegrenzen reguliert. Die Aktivierung von EphA7 durch Ephrin-A-Liganden löst bidirektionale Signalgebung sowie nachgeschaltete Signalwege aus, darunter die Kontrolle der Zytoskelettdynamik durch Rho-Familien-GTPasen und die Modulation von MAPK/ERK- und PI3K/AKT-Netzwerken, was Adhäsion, Migration und Proliferation beeinflusst. Eine dysregulierte EPHA7-Expression oder -Signalgebung wurde mit veränderten neuroentwicklungsbezogenen Schaltkreisen sowie mit onkogenen Prozessen wie gestörter Wachstumskontrolle und invasivem Verhalten in verschiedenen Tumorkontexten in Verbindung gebracht. Werkzeuge zur Geneditierung von EPHA7 und funktionelle Genomik ermöglichen mechanistische Untersuchungen der Ephrin–Eph-Signalgebung, der Rezeptorphosphorylierung und -Trafficking sowie des Pathway-Crosstalks in neuronalen Modellen, Organoiden und Krebszell-Systemen.

EphA7 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente EPHA7-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

EphA7 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der EPHA7-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen EphA7-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen EPHA7-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.