Plasmide CRISPR/Cas9 KO eotaxin-3 (h): sc-405762
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- eotaxin-3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique eotaxin-3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: eotaxin-3 Antibody (500-M32): sc-65349
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO eotaxin-3 (h) | sc-405762 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CCL26 code pour l’éotaxine‑3, une chimiokine de la famille CC qui se lie à CCR3 pour orienter la chimiotaxie et l’activation des éosinophiles, des basophiles et des cellules immunitaires polarisées Th2. Son expression est couramment induite dans les compartiments épithéliaux et stromaux par la signalisation IL‑4/IL‑13 via l’axe JAK–STAT6, ce qui l’associe aux programmes inflammatoires de type 2 et au trafic des leucocytes. L’éotaxine‑3 contribue à la régulation de l’inflammation tissulaire, des réponses immunitaires liées aux barrières et à l’amplification des réseaux cytokines–chimiokines. Une régulation altérée de CCL26 et une élévation de l’éotaxine‑3 ont été rapportées dans des affections allergiques et des conditions inflammatoires associées aux éosinophiles, ce qui étaye son intérêt en tant que nœud mécanistique dans la recherche sur l’inflammation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO eotaxin-3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CCL26 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CCL26, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CCL26 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine eotaxin-3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CCL26 pour l'étude de la signalisation de eotaxin-3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CCL26 essentiels à la fonction de eotaxin-3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CCL26 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le eotaxin-3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le eotaxin-3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CCL26. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le eotaxin-3 plasmide HDR (h) et le eotaxin-3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CCL26 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CCL26 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.