ENHO Lentiviral Activation Particles (h): sc-418381-LAC

ENHO kodiert Adropin, ein sezerniertes Peptidhormon mit Funktionen in der systemischen Energiehomöostase und der kardiovaskulären Biologie. Adropin beeinflusst die Substratnutzung und metabolische Signalwege und verknüpft den Nährstoffstatus mit Pfaden, die die Glukoseverwertung, Lipidoxidation, Endothelfunktion und den Entzündungstonus regulieren. Eine veränderte ENHO-Expression wurde in Forschungszusammenhängen mit metabolischer Dysregulation, insulinresistenzassoziierten Phänotypen und kardiometabolischen Risikomerkmalen in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für Studien zu Adipositas, Mechanismen des Typ-2-Diabetes und vaskulärer Dysfunktion unterstreicht. Als zirkulierender Faktor wird ENHO außerdem genutzt, um die interorganische Kommunikation zwischen Leber, Fettgewebe, Skelettmuskel und Endothel zu untersuchen.

ENHO Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ENHO-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ENHO Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ENHO-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ENHO-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ENHO-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.