Partículas Lentivirales de Activación (h) ENHO: sc-418381-LAC

ENHO codifica adropina, una hormona peptídica secretada con funciones en la homeostasis energética sistémica y en la biología cardiovascular. La adropina influye en la utilización de combustibles y en la señalización metabólica, conectando el estado nutricional con vías que regulan el manejo de la glucosa, la oxidación de lípidos, la función endotelial y el tono inflamatorio. En contextos de investigación, la alteración de la expresión de ENHO se ha asociado con desregulación metabólica, fenotipos relacionados con la resistencia a la insulina y rasgos de riesgo cardiometabólico, lo que respalda su relevancia para estudios sobre obesidad, mecanismos de la diabetes tipo 2 y disfunción vascular. Como factor circulante, ENHO también se utiliza para investigar la comunicación entre órganos entre el hígado, el tejido adiposo, el músculo esquelético y el endotelio.

Las partículas de activación lentiviral ENHO (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ENHO en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral ENHO (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ENHO, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de ENHO. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ENHO y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.