Partículas Lentivirales de Activación (h) Endoglin/CD105: sc-400599-LAC

ENG codifica endoglina (CD105), un correceptor transmembrana para ligandos de la superfamilia TGF-β que modula la señalización a través de ALK1/ALK5 y de las vías posteriores SMAD1/5/8 y SMAD2/3. Altamente expresada en células endoteliales en proliferación, la endoglina regula las respuestas angiogénicas, la proliferación y migración endoteliales, y la remodelación de la matriz extracelular. Al ajustar el equilibrio de señalización BMP9/10–TGF-β, ENG influye en el desarrollo vascular, la remodelación vascular asociada a la inflamación y la dinámica de adhesión célula–célula. La alteración de la expresión o función de ENG se ha implicado en la biología de las malformaciones vasculares, la disfunción endotelial y contextos de investigación sobre angiogénesis asociada a tumores, proporcionando un punto de entrada mecanístico para el análisis de estas vías.

Las partículas de activación lentiviral Endoglin/CD105 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de ENG en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Endoglin/CD105 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción ENG, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Endoglin/CD105. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo ENG y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.