Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Endo180 (h): sc-403483
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Endo180 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Endo180, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Endo180 Antibody (B-10): sc-271148
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Endo180 (h) | sc-403483 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
MRC2 code pour Endo180 (également appelé uPARAP), un récepteur endocytaire transmembranaire de la famille des récepteurs au mannose, qui se lie au collagène et l’internalise en vue de sa dégradation lysosomale. Endo180 relie le remodelage de la matrice extracellulaire à l’adhésion et à la migration cellulaires en régulant le renouvellement du collagène, la signalisation associée aux intégrines et des voies de trafic liées à l’endocytose. Par son rôle dans la capture du collagène et la dynamique matricielle, Endo180 contribue au remodelage du stroma et à des phénotypes cellulaires invasifs fréquemment étudiés en cancérologie, dans la fibrose et lors de la réparation tissulaire. Une activité dérégulée de MRC2/Endo180 a été associée à des perturbations de l’homéostasie de la matrice extracellulaire et à des modifications du microenvironnement pertinentes pour les mécanismes pathologiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Endo180 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MRC2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MRC2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MRC2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Endo180.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MRC2 pour l'étude de la signalisation de Endo180, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de MRC2 essentiels à la fonction de Endo180
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MRC2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Endo180 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Endo180 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MRC2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Endo180 plasmide HDR (h) et le Endo180 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MRC2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MRC2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.