Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Emx1 (m): sc-420169
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Emx1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Emx1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Emx1 Antibody (G-6): sc-398115
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Emx1 (m) | sc-420169 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
EMX1 (empty spiracles homeobox 1) est un facteur de transcription à homéoboîte de type paired-like, impliqué dans la mise en place précoce du patron du télencéphale et l’aréalisation du néocortex au cours du développement embryonnaire de la souris. Il régule des programmes d’expression génique qui contrôlent la prolifération des progéniteurs neuraux, la différenciation neuronale et la lamination corticale, en s’intégrant à des réseaux de signalisation du développement tels que WNT/β-caténine et SHH, qui façonnent l’identité régionale du cerveau antérieur. L’expression d’Emx1 est largement utilisée comme marqueur des lignages du télencéphale dorsal, permettant des études mécanistiques de la corticogenèse et de l’assemblage des circuits. Des réseaux transcriptionnels associés à EMX1 dérégulés sont pertinents pour des phénotypes neurodéveloppementaux affectant la structure cérébrale et la spécification des lignages de neurones excitateurs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Emx1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Emx1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Emx1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Emx1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Emx1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Emx1 pour l'étude de la signalisation de Emx1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Emx1 essentiels à la fonction de Emx1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Emx1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Emx1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Emx1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Emx1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Emx1 plasmide HDR (m) et le Emx1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Emx1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Emx1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.