Plasmide Double Nickase (h) EMMPRIN/CD147: sc-400589-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) EMMPRIN/CD147 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide EMMPRIN/CD147 Double Nickase (h) et le plasmide EMMPRIN/CD147 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BSG. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: EMMPRIN/CD147 Antibody (8D6): sc-21746
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) EMMPRIN/CD147 | sc-400589-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) EMMPRIN/CD147 | sc-400589-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Basigine (BSG), également connue sous le nom d’EMMPRIN/CD147, est une protéine transmembranaire hautement glycosylée de la superfamille des immunoglobulines, qui organise les interactions cellule–cellule et cellule–matrice et module de multiples réseaux de signalisation. Elle est surtout connue pour stimuler la production de métalloprotéinases matricielles (MMP) et faciliter le remodelage de la matrice extracellulaire, avec des effets en aval sur l’invasion, les réponses angiogéniques et la signalisation inflammatoire. CD147 agit aussi comme chaperon des transporteurs de monocarboxylates (p. ex., MCT1/MCT4), reliant le transport du lactate à la reprogrammation métabolique et aux voies d’adaptation à l’hypoxie. Une expression dérégulée de BSG est associée à la progression tumorale, à la fibrose et aux interactions hôte–cellule des agents pathogènes, ce qui en fait un nœud central pour l’étude du remodelage du microenvironnement et du couplage métabolique.
EMMPRIN/CD147 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BSG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BSG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BSG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BSG.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.