Plasmide Double Nickase (m) EMID1: sc-431233-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) EMID1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide EMID1 Double Nickase (m) et le plasmide EMID1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Emid1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: EMID1 Antibody (G-12): sc-390288
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) EMID1 | sc-431233-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) EMID1 | sc-431233-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EMID1 (EMI domain containing 1) est une protéine sécrétée associée à la matrice extracellulaire (MEC), impliquée dans l’organisation des matrices péricellulaires et la modulation des interactions cellule–matrice au cours du développement et de l’homéostasie tissulaire chez la souris. Grâce à sa localisation dans la MEC et à ses modules d’interaction protéine–protéine prédits, EMID1 est étudiée dans le contexte de la signalisation dépendante de l’adhérence, de l’assemblage de la membrane basale et de la régulation de processus morphogénétiques influençant la migration et la différenciation cellulaires. La dérégulation de la composition et du remodelage de la MEC est une caractéristique fréquente de la fibrose, des anomalies du développement et des modifications du microenvironnement tumoral, faisant d’Emid1 une cible pertinente pour des études mécanistiques des phénotypes pilotés par la matrice. Les modèles murins d’Emid1 peuvent aider à disséquer la manière dont les composants de la MEC coordonnent des sorties de signalisation qui affectent l’architecture tissulaire et les réponses au stress.
EMID1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Emid1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Emid1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Emid1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Emid1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.