Plasmide Double Nickase (h) Embigin: sc-408321-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Embigin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Embigin Double Nickase (h) et le plasmide Embigin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EMB. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Embigin | sc-408321-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Embigin | sc-408321-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **EMB** code l’embigine, une glycoprotéine transmembranaire de type I appartenant à la superfamille des immunoglobulines, qui agit comme molécule accessoire des transporteurs de monocarboxylates et contribue aux interactions cellule–cellule et cellule–matrice. En modulant les flux de lactate et d’autres monocarboxylates et en participant à une signalisation liée à l’adhésion, l’embigine peut influencer l’homéostasie métabolique, le trafic membranaire et les programmes de migration cellulaire. L’expression d’**EMB** a été étudiée dans le contexte du remodelage tissulaire et du métabolisme dérégulé, ce qui la rend pertinente pour des travaux sur l’adaptation métabolique associée aux tumeurs et les interactions avec le microenvironnement. Sa localisation à la surface cellulaire et ses interactions avec des partenaires se prêtent à l’exploration mécanistique de la régulation des transporteurs et des voies dépendantes de l’adhésion.
Embigin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EMB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EMB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EMB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EMB.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.