Plasmide Double Nickase (h) ELOVL4: sc-407562-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ELOVL4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ELOVL4 Double Nickase (h) et le plasmide ELOVL4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ELOVL4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ELOVL4 | sc-407562-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ELOVL4 | sc-407562-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL4 code une élongase localisée dans le réticulum endoplasmique, qui catalyse la synthèse d’acides gras à très longue chaîne, notamment des substrats nécessaires à des lipides spécialisés tels que les lipides rétiniens et épidermiques. En allongeant les acyl-CoA à longue chaîne, ELOVL4 contribue à l’homéostasie lipidique, à la composition membranaire et à la fonction de barrière, en influençant des voies liées au métabolisme des sphingolipides et des phospholipides. Une perturbation de l’activité d’ELOVL4 modifie les réservoirs de lipides à très longue chaîne et a été associée à des phénotypes de dégénérescence rétinienne héréditaire ainsi qu’à des troubles neurocutanés, soulignant son importance pour l’intégrité des photorécepteurs et la physiologie cutanée. En tant que nœud métabolique à l’interface de l’élongation des acides gras et du remodelage lipidique des organites, ELOVL4 est fréquemment étudiée dans des contextes de stress lipidique, de biophysique membranaire et d’exigences lipidiques spécifiques aux tissus.
ELOVL4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ELOVL4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ELOVL4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ELOVL4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ELOVL4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.