Plásmido Doble Nickase (h) ELOVL3: sc-407282-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ELOVL3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ELOVL3 (h) y el plásmido de doble nickasa ELOVL3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ELOVL3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ELOVL3 | sc-407282-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ELOVL3 | sc-407282-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL3 (proteína 3 de elongación de ácidos grasos de cadena muy larga) es una elongasa de ácidos grasos localizada en el retículo endoplásmico que cataliza pasos de condensación limitantes de la velocidad en la síntesis de ácidos grasos de cadena muy larga. Al moldear la composición lipídica celular, ELOVL3 contribuye al metabolismo de triglicéridos y ésteres de cera, a la homeostasis de las gotas lipídicas y a una remodelación más amplia de los lípidos de membrana vinculada a la adaptación metabólica. Su actividad se conecta con las vías de elongación de ácidos grasos y con la biosíntesis posterior de esfingolípidos y lípidos complejos, que influyen en la función de barrera y el equilibrio energético. La expresión desregulada de ELOVL3 se ha asociado con alteraciones en el manejo de lípidos en contextos metabólicos y dermatológicos, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por lípidos.
ELOVL3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ELOVL3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ELOVL3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ELOVL3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ELOVL3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.