Plasmide Double Nickase (h) ELOVL3: sc-407282-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ELOVL3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ELOVL3 Double Nickase (h) et le plasmide ELOVL3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ELOVL3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ELOVL3 | sc-407282-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ELOVL3 | sc-407282-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL3 (élongation des acides gras à très longue chaîne, protéine 3) est une élongase d’acides gras localisée dans le réticulum endoplasmique, qui catalyse des étapes de condensation limitantes dans la synthèse des acides gras à très longue chaîne. En modulant la composition lipidique cellulaire, ELOVL3 contribue au métabolisme des triglycérides et des esters de cire, à l’homéostasie des gouttelettes lipidiques et, plus largement, au remodelage des lipides membranaires lié à l’adaptation métabolique. Son activité est reliée aux voies d’élongation des acides gras et à la biosynthèse en aval des sphingolipides et des lipides complexes, qui influencent la fonction barrière et l’équilibre énergétique. Une expression dérégulée d’ELOVL3 a été associée à une altération de la gestion des lipides dans des contextes métaboliques et dermatologiques, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de phénotypes induits par les lipides.
ELOVL3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ELOVL3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ELOVL3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ELOVL3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ELOVL3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.