ELOVL3 Plasmide Double Nickase (h): sc-407282-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ELOVL3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ELOVL3 Double Nickase Plasmid (h) e il ELOVL3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ELOVL3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ELOVL3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-407282-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ELOVL3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-407282-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELOVL3 (proteina 3 dell’allungamento degli acidi grassi a catena molto lunga) è un’elongasi di acidi grassi localizzata nel reticolo endoplasmatico che catalizza le fasi di condensazione limitanti la velocità nella sintesi degli acidi grassi a catena molto lunga. Modellando la composizione lipidica cellulare, ELOVL3 contribuisce al metabolismo dei trigliceridi e degli esteri cerosi, all’omeostasi delle goccioline lipidiche e a un più ampio rimodellamento dei lipidi di membrana legato all’adattamento metabolico. La sua attività è connessa alle vie di allungamento degli acidi grassi e alla biosintesi a valle di sfingolipidi e lipidi complessi, che influenzano la funzione barriera e l’equilibrio energetico. Un’espressione deregolata di ELOVL3 è stata associata ad alterazioni della gestione dei lipidi in contesti metabolici e dermatologici, rendendola rilevante per studi meccanicistici di fenotipi guidati dai lipidi.
ELOVL3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ELOVL3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ELOVL3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ELOVL3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ELOVL3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.