Electrophoresis Sample Buffer, 2X

Le tampon d'électrophorèse, généralement préparé à une concentration de 2X, est un composant essentiel utilisé dans les techniques d'électrophorèse sur gel, telles que le SDS-PAGE (électrophorèse sur gel de dodécyl sulfate de sodium et de polyacrylamide) et l'électrophorèse sur gel d'agarose. Ce tampon a plusieurs fonctions : Dénaturation : Le tampon d'échantillonnage contient généralement des agents dénaturants tels que le SDS, qui perturbe les structures secondaires et tertiaires des protéines, garantissant qu'elles adoptent une forme linéaire et qu'elles sont chargées uniformément en fonction de leur masse. Stabilisation : Des tampons tels que le Tris-HCl ou le phosphate sont inclus pour maintenir un pH stable, garantissant des conditions optimales pour la migration des protéines. Coloration : Des colorants comme le bleu de bromophénol ou le bleu de Coomassie sont souvent ajoutés au tampon pour visualiser le chargement de l'échantillon pendant l'électrophorèse et pour contrôler la progression de la série. Agent réducteur : Dans le cas du SDS-PAGE, un agent réducteur tel que le bêta-mercaptoéthanol ou le dithiothréitol (DTT) peut être ajouté pour rompre les liaisons disulfures et dénaturer complètement les protéines. La concentration 2X indique que le tampon est deux fois plus concentré que ce qui est généralement utilisé dans le gel. Cela permet aux chercheurs de mélanger le tampon d'échantillon avec leur échantillon dans un rapport 1:1, ce qui donne une concentration finale de 1X adaptée au chargement sur le gel. Dans l'ensemble, le tampon d'électrophorèse à une concentration de 2X est un composant essentiel des expériences d'électrophorèse sur gel, assurant une séparation et une visualisation efficaces des protéines ou des acides nucléiques en fonction de leur taille et de leur charge.