Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) eIF4AII: sc-402758-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) eIF4AII correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide eIF4AII Double Nickase (h) et le plasmide eIF4AII Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EIF4A2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: eIF4AII Antibody (H-5): sc-137148
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) eIF4AII | sc-402758-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) eIF4AII | sc-402758-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF4A2 code pour eIF4AII, une hélicase ARN de type DEAD-box qui agit au sein du complexe d’initiation de la traduction eIF4F pour dérouler les régions 5′ UTR structurées et favoriser le chargement des ribosomes. En régulant la traduction dépendante de la coiffe, eIF4AII influence la production du protéome lors de la croissance, des réponses au stress et de la progression du cycle cellulaire, et interagit avec des voies du métabolisme de l’ARN qui contrôlent la stabilité des ARNm et l’efficacité de traduction. Une altération du contrôle de l’initiation de la traduction est associée à une dérégulation de la signalisation et de la protéostasie, faisant d’EIF4A2 un nœud pertinent pour étudier les programmes de traduction oncogéniques et les vulnérabilités dépendantes de l’ARN. L’activité d’eIF4AII est également importante dans des contextes où la traduction sélective de transcrits structurés façonne la différenciation et l’expression génique adaptative au stress.
eIF4AII Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EIF4A2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EIF4A2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EIF4A2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EIF4A2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.