Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) eIF4AI: sc-402623-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) eIF4AI correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide eIF4AI Double Nickase (h) et le plasmide eIF4AI Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EIF4A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) eIF4AI | sc-402623-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) eIF4AI | sc-402623-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF4A1 code l’hélicase d’ARN humaine eIF4AI de la famille DEAD-box, un composant central du complexe d’initiation de la traduction eIF4F, qui déroule les 5′ UTR structurées afin de permettre le balayage du complexe de pré‑initiation 43S et la reconnaissance du codon initiateur. En contrôlant la traduction des ARNm dépendante de la coiffe, eIF4AI influence la protéostase, la progression du cycle cellulaire et les programmes d’adaptation au stress, en s’intégrant à des nœuds de signalisation modulant l’initiation, tels que les voies mTOR/4E‑BP et MAPK. Une activité d’EIF4A1 altérée et une dépendance à la traduction pilotée par eIF4A sont fréquemment étudiées dans des contextes de croissance et de survie dérégulées, notamment les programmes transcriptionnels oncogéniques et les réponses au stress. EIF4A1 est également utilisé comme point d’entrée mécanistique pour étudier la reprogrammation traductionnelle, la fonction des hélicases d’ARN et la traduction sélective de sous‑ensembles d’ARNm complexes.
eIF4AI Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EIF4A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EIF4A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EIF4A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EIF4A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.