Plasmide Double Nickase (h) eIF2S3: sc-406266-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) eIF2S3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide eIF2S3 Double Nickase (h) et le plasmide eIF2S3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EIF2S3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) eIF2S3 | sc-406266-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) eIF2S3 | sc-406266-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF2S3 code la sous-unité gamma du facteur d’initiation de la traduction eucaryote 2 (eIF2γ), un composant central du complexe ternaire eIF2 qui délivre l’ARNt initiateur Met‑ARNti à la sous-unité ribosomique 40S lors de l’initiation de la traduction dépendante de la coiffe. eIF2S3 participe au contrôle de la synthèse protéique globale et de programmes de traduction sélectifs liés à la réponse intégrée au stress, dans laquelle la phosphorylation d’eIF2α modifie la dynamique d’initiation et reprogramme la traduction des ARNm. Par ces voies, EIF2S3 influence la protéostasie, la progression du cycle cellulaire et l’adaptation au stress dans divers types cellulaires. La perturbation génétique ou la dérégulation d’EIF2S3 est associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et à des maladies syndromiques liées à l’X, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques du contrôle traductionnel dans des modèles pertinents pour les maladies.
eIF2S3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EIF2S3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EIF2S3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EIF2S3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EIF2S3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.