EHMT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402460

Visão geral

EHMT1 (metiltransferase de lisina de histona eucromática 1) codifica uma metiltransferase que contém um domínio SET e que catalisa principalmente a mono- e a dimetilação da lisina 9 da histona H3 (H3K9me1/2), promovendo repressão transcricional na eucromatina. Como parte de complexos regulatórios epigenéticos com parceiros como EHMT2/G9a, a EHMT1 ajuda a moldar a acessibilidade da cromatina, coordenar programas de expressão gênica específicos de linhagem e estabilizar a identidade celular durante o desenvolvimento e a diferenciação. A metilação de H3K9 dependente de EHMT1 interage com a metilação do DNA e com a organização da heterocromatina para influenciar a estabilidade do genoma e a regulação gênica de longo alcance. A desregulação da atividade ou da dosagem de EHMT1 tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a alterações na expressão de genes neuronais, sendo estudada em contextos que incluem função sináptica, vias relacionadas à cognição e mecanismos de doença associados à cromatina.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EHMT1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EHMT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EHMT1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EHMT1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EHMT1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EHMT1 para a investigação da sinalização de EHMT1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EHMT1 críticos para a função EHMT1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EHMT1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo EHMT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo EHMT1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EHMT1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo EHMT1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR EHMT1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EHMT1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EHMT1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.