Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) EED: sc-401234-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) EED correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide EED Double Nickase (h) et le plasmide EED Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EED. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: EED Antibody (3B12): sc-293203
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) EED | sc-401234-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) EED | sc-401234-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EED code un composant central du complexe Polycomb répressif 2 (PRC2), qui se lie à l’histone H3 triméthylée sur la lysine 27 (H3K27me3) et stimule de façon allostérique l’activité méthyltransférase d’EZH2/EZH1 afin de propager des domaines de chromatine répressive. Par le silençage génique dépendant de PRC2, EED contribue au maintien de l’identité cellulaire, au contrôle des programmes transcriptionnels du développement et à la régulation de la prolifération et de la différenciation. Une perturbation d’EED désorganise la répression épigénétique et peut modifier les voies qui gouvernent l’engagement de lignée et l’organisation de la chromatine. Un dysfonctionnement de PRC2/EED est impliqué dans de nombreux cancers et troubles du développement, faisant d’EED une cible fréquente dans les études sur le contrôle épigénétique et la répression transcriptionnelle.
EED Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EED dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EED. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EED. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EED.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.