Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Ebi3: sc-401552-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ebi3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ebi3 Double Nickase (h) et le plasmide Ebi3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant EBI3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ebi3 Antibody (G-4): sc-166158
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ebi3 | sc-401552-NIC | 20 µg | $410.00 |
EBI3 code le gène 3 induit par le virus d’Epstein–Barr (Ebi3), une sous-unité de cytokine sécrétée qui forme un hétérodimère avec p28 pour constituer l’IL‑27 et avec p35 pour constituer l’IL‑35, assurant le lien entre la régulation de l’immunité innée et adaptative. Via la signalisation IL‑27/IL‑35, Ebi3 influence des programmes transcriptionnels médiés par JAK/STAT qui orientent la différenciation des cellules T, la production de cytokines inflammatoires et la fonction des cellules présentatrices d’antigènes. Une expression altérée d’EBI3 a été associée à des réponses immunitaires dérégulées dans des contextes auto-immuns et inflammatoires, et le gène est fréquemment étudié en immunologie tumorale et lors d’infections chroniques. Ces caractéristiques font d’EBI3 une cible utile pour disséquer les circuits de cytokines et les voies d’immunorégulation dans des modèles cellulaires humains.
Ebi3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus EBI3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de EBI3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de EBI3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de EBI3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.