Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) E2F1: sc-420085-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) E2F1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide E2F1 Double Nickase (m) et le plasmide E2F1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant E2f1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: E2F1 Antibody (KH95): sc-251
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) E2F1 | sc-420085-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) E2F1 | sc-420085-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
E2F1 (E2f1) est un facteur de transcription spécifique de séquence qui coordonne la transition G1/S en régulant les gènes nécessaires à la réplication de l’ADN, au métabolisme des nucléotides et au contrôle des points de contrôle. Dans les cellules murines, l’activité d’E2F1 est contrôlée par la voie RB et la signalisation des kinases dépendantes des cyclines, intégrant les signaux mitogènes à la progression du cycle cellulaire. Au-delà de la prolifération, E2F1 contribue aux réponses aux dommages de l’ADN et à l’apoptose via des interactions avec les voies de signalisation associées à p53 et à ATM/ATR, influençant la stabilité génomique. Des programmes d’E2F1 dérégulés sont fréquemment associés à une prolifération aberrante, au stress de réplication et à la transformation oncogénique, faisant d’E2f1 une cible largement étudiée en biologie du cancer et en recherche sur le cycle cellulaire.
E2F1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus E2f1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de E2f1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de E2f1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de E2f1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.