Plasmide Double Nickase (h) Dynein IC2, cytosolic: sc-402079-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Dynein IC2, cytosolic correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Dynein IC2, cytosolic Double Nickase (h) et le plasmide Dynein IC2, cytosolic Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DYNC1I2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Dynein IC2, cytosolic | sc-402079-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Dynein IC2, cytosolic | sc-402079-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DYNC1I2 code la chaîne intermédiaire 2 de la dynéine cytoplasmique 1 (Dynein IC2), une sous-unité essentielle du complexe moteur de microtubules dirigé vers l’extrémité moins, qui assure le couplage de la dynéine à la dynactine et à divers adaptateurs de cargaison. Ce système moteur soutient le trafic intracellulaire des endosomes, des lysosomes et des vésicules dérivées de l’appareil de Golgi, ainsi que le positionnement du centrosome, l’organisation du fuseau mitotique et le transport rétrograde nécessaire à l’homéostasie neuronale. La fonction de Dynein IC2 s’intègre aux voies du transport dépendant des microtubules, de la progression du cycle cellulaire et de la dynamique des organites, qui façonnent la polarité et la protéostasie. Des altérations de la machinerie dynéine–dynactine ont été impliquées dans des phénotypes neurodéveloppementaux et neurodégénératifs, ainsi que dans d’autres troubles liés à des défauts de transport axonal et de fidélité mitotique, faisant de DYNC1I2 un point d’entrée utile pour des études mécanistiques.
Dynein IC2, cytosolic Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DYNC1I2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DYNC1I2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DYNC1I2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DYNC1I2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.