Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420081

Descripción general

El gen Dvl2 de ratón codifica Dishevelled 2 (DVL2), una proteína andamiaje citoplasmática que transmite señales desde los receptores Frizzled hacia las vías Wnt downstream. DVL2 integra la señalización Wnt/β-catenina canónica con las cascadas no canónicas de polaridad celular planar (PCP) y Wnt/Ca²⁺ al coordinar complejos cercanos al receptor y regular la dinámica del citoesqueleto, la polaridad y el tráfico intracelular. A través de estas funciones, DVL2 contribuye al patrón embrionario, al comportamiento de células madre/progenitoras y a la homeostasis tisular, y su desregulación se examina con frecuencia en contextos de señalización Wnt aberrante vinculada a defectos del desarrollo y a programas de señalización oncogénicos. Dvl2 también se estudia por sus efectos sobre la migración celular y la morfogénesis, donde el equilibrio entre la transcripción dependiente de β-catenina y las salidas de PCP es crítico.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Dvl2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Dvl2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Dvl2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Dvl2 para la investigación de la señalización de Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Dvl2 críticos para la función de Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Dvl2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Dvl2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 (m) y el plásmido HDR Dvl-2/Dishevelled 2/DVL2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Dvl2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Dvl2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.