Plasmide Double Nickase (h) DSC3: sc-404696-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DSC3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DSC3 Double Nickase (h) et le plasmide DSC3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DSC3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DSC3 Antibody (93-71): sc-81806
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DSC3 | sc-404696-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DSC3 | sc-404696-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **DSC3** code la **desmocollin-3**, une cadhérine dépendante du calcium qui constitue le cœur adhésif des **desmosomes** dans les épithéliums stratifiés. DSC3 coopère avec les desmogléines et les protéines cytoplasmiques de la plaque pour relier les filaments intermédiaires et maintenir l’intégrité tissulaire, contribuant à des voies qui régissent l’assemblage des jonctions cellule–cellule, la différenciation épithéliale et les réponses au stress mécanique. Une expression altérée de DSC3 ou un dysfonctionnement des desmosomes a été associé à une fonction barrière compromise, à des modifications de la cohésion et de la motilité cellulaires, ainsi qu’à des phénotypes pathologiques épithéliaux, notamment la progression liée aux cancers et des dermatoses inflammatoires. Comme les desmosomes s’interfacent avec le remodelage du cytosquelette et des réseaux de signalisation, DSC3 est fréquemment étudié en biologie des jonctions, en homéostasie épithéliale et dans la régulation de l’expression génique dépendante de l’adhérence.
DSC3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DSC3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DSC3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DSC3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DSC3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.