Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
DPH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409607
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DPH2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DPH2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DPH2 Anticorpo (6E7): sc-101200
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DPH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-409607 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DPH2 codifica uma enzima essencial na via de biossíntese da diftamida, que modifica uma histidina conservada no fator de elongação da tradução eucariótico 2 (EEF2). Essa modificação pós-traducional sustenta a fidelidade da tradução e influencia as respostas celulares ao estresse direcionado ao ribossomo, vinculando a atividade de DPH2 ao controle central da síntese proteica. A perturbação de componentes da via da diftamida pode alterar a proteostase e a sinalização de estresse, tornando DPH2 um ponto útil para estudar mecanismos de regulação translacional. Como a diftamida em EEF2 também é um determinante de sensibilidade a certas toxinas bacterianas, DPH2 oferece um ponto de entrada viável para investigar interações hospedeiro–patógeno e a biologia de toxinas em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DPH2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DPH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DPH2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DPH2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DPH2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DPH2 para a investigação da sinalização de DPH2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DPH2 críticos para a função DPH2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DPH2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DPH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DPH2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DPH2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DPH2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DPH2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DPH2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DPH2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.