Plásmido Doble Nickase (h) DND1: sc-404161-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)DND1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DND1 (h) y el plásmido de doble nickasa DND1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DND1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DND1 Anticuerpo (X22): sc-130493
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) DND1 | sc-404161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) DND1 | sc-404161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DND1 (dead end homolog 1) codifica una proteína de unión a ARN que modula la regulación génica posranscripcional al unirse a ARNm específicos e influir en su estabilidad y traducción. Se ha caracterizado principalmente en la biología de las células germinales, donde contribuye al mantenimiento de la identidad germinal y favorece una diferenciación adecuada al amortiguar los programas de expresión génica. DND1 puede contrarrestar la represión mediada por microARN en determinados transcritos, lo que lo vincula con redes más amplias que controlan el recambio de ARN y la temporización del desarrollo. La desregulación de los circuitos reguladores de ARN asociados a DND1 se ha relacionado con un desarrollo germinal anómalo y se ha estudiado en el contexto de la susceptibilidad a tumores de células germinales y de programas oncogénicos relacionados.
DND1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DND1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DND1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DND1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DND1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.