Plasmide Double Nickase (m) DnaJC3: sc-437172-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) DnaJC3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DnaJC3 Double Nickase (m) et le plasmide DnaJC3 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Dnajc3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) DnaJC3 | sc-437172-NIC | 20 µg | $410.00 |
Dnajc3 code DnaJC3, un co‑chaperon associé au réticulum endoplasmique (également appelé P58IPK) qui aide à maintenir la protéostasie lors de la signalisation de la réponse aux protéines mal repliées (UPR). DnaJC3 module les voies sensibles au stress en interagissant avec les chaperonnes de la famille Hsp70 et en régulant l’axe PERK–eIF2α du stress du RE, influençant ainsi le contrôle de la traduction et l’adaptation aux conditions protéotoxiques. Par ses rôles dans le contrôle qualité du RE et l’atténuation de la signalisation des kinases de stress, DnaJC3 est pertinent pour la recherche sur la fonction des cellules sécrétrices, l’inflammation et le stress métabolique. Une gestion altérée du stress du RE liée à l’activité de DnaJC3 est fréquemment étudiée dans des contextes tels que l’homéostasie des cellules β pancréatiques, les déséquilibres de protéostasie associés à la neurodégénérescence et, plus largement, les phénotypes de réponse au stress dans des modèles murins.
DnaJC3 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Dnajc3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Dnajc3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Dnajc3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Dnajc3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.