Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
DNA pol β Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402861-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DNA pol βO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DNA pol β (h) e o Plasmídeo Double Nickase DNA pol β (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para POLB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DNA pol β Anticorpo (D-11): sc-376581
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DNA pol β Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402861-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DNA pol β Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402861-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
POLB codifica a DNA polimerase beta (DNA pol β), uma enzima-chave da via de reparo por excisão de bases (BER) que preenche lacunas de um único nucleotídeo e processa intermediários de 5′-desoxirribose fosfato durante a síntese de reparo. Por meio de uma ação coordenada com XRCC1, DNA ligase III e DNA glicosilases, a DNA pol β ajuda a manter a integridade do genoma após danos oxidativos, alquilação e perda espontânea de bases. Alterações na atividade ou na expressão de POLB têm sido associadas ao aumento da mutagênese e da instabilidade cromossômica, conectando essa via a mecanismos que contribuem para a biologia do câncer e para o declínio genômico associado ao envelhecimento. Como um fator central do BER, a DNA pol β é frequentemente estudada pelo seu impacto na sinalização de dano ao DNA, nas respostas ao estresse replicativo e na sensibilidade celular a agentes genotóxicos.
DNA pol β O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus POLB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de POLB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função POLB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com POLB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.