DNA Ligase I Lentiviral Activation Particles (h): sc-402830-LAC

Das humane Gen **LIG1** kodiert die DNA-Ligase I, eine ATP-abhängige Ligase, die DNA-Einzelstrangbrüche („Nicks“) abdichtet, indem sie während der Replikation des Folgestrangs, bei der Prozessierung von Okazaki-Fragmenten und bei der Long-Patch-Basenexzisionsreparatur die Bildung von Phosphodiesterbindungen katalysiert. DNA-Ligase I wirkt an der Replikationsgabel und innerhalb von DNA-Schadensantwort-Netzwerken, die mit PCNA, RFC, FEN1 und Polymerasen koordiniert sind, und unterstützt so Genomstabilität und eine zuverlässige Zellzyklusprogression. Störungen der LIG1-Aktivität oder -Expression sind mit erhöhtem Replikationsstress, der Akkumulation von Strangbrüchen und einer erhöhten Mutationslast verbunden, was die Onkogenese und andere Phänotypen genomischer Instabilität beeinflussen kann. Als zentraler Faktor der replikationsgekoppelten Reparatur wird LIG1 häufig in Signalwegen untersucht, die S‑Phasen-Checkpoints, Chromatin-Erhalt sowie Antworten auf oxidative oder Alkylierungsschäden steuern.

DNA Ligase I Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente LIG1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

DNA Ligase I Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der LIG1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen DNA Ligase I-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen LIG1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.