Plasmide Double Nickase (m) DLK2: sc-430660-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) DLK2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DLK2 Double Nickase (m) et le plasmide DLK2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Dlk2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) DLK2 | sc-430660-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) DLK2 | sc-430660-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin Dlk2 code DLK2, une protéine transmembranaire comportant des répétitions de type EGF, appartenant à la famille Delta-like et apparentée aux ligands canoniques de Notch. DLK2 peut moduler l’activité de la voie Notch et, ce faisant, influencer des programmes dépendants du contexte tels que les décisions de destinée cellulaire, la différenciation et le remodelage tissulaire. Dans des contextes développementaux et d’homéostasie, une activité altérée de DLK2 a été associée à des changements dans le maintien des progéniteurs et l’engagement de lignée, ce qui concorde avec une communication croisée entre la signalisation Notch et des réseaux transcriptionnels régulés par des facteurs de croissance. Étant donné que la dérégulation de la voie Notch est largement impliquée dans la signalisation oncogénique et les interactions stroma–épithélium, Dlk2 est fréquemment étudié comme nœud régulateur dans des modèles de biologie tumorale et de développement.
DLK2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Dlk2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Dlk2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Dlk2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Dlk2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.