Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DGUOK Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407916
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- DGUOK El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico DGUOK, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: DGUOK Anticuerpo (H-3): sc-376267
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
DGUOK Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407916 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La desoxiguanosina quinasa (DGUOK) es una desoxirribonucleósido quinasa mitocondrial que cataliza la fosforilación de desoxirribonucleósidos de purina, sosteniendo el reservorio mitocondrial de desoxinucleótidos necesario para la replicación y la reparación del ADNmt. Actúa dentro de las vías mitocondriales de rescate de nucleótidos y contribuye al mantenimiento del genoma, a la capacidad de fosforilación oxidativa y a la homeostasis bioenergética celular. La alteración de la actividad de DGUOK se asocia con fenotipos de depleción de ADN mitocondrial y con disfunción mitocondrial, por lo que es relevante para estudios de trastornos mitocondriales, síndromes hepatocerebrales y defectos del metabolismo energético en células humanas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO DGUOK (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DGUOK en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DGUOK junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DGUOK tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DGUOK.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DGUOK para la investigación de la señalización de DGUOK, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DGUOK críticos para la función de DGUOK
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DGUOK para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido DGUOK CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DGUOK CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DGUOK. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DGUOK (h) y el plásmido HDR DGUOK (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DGUOK para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DGUOK definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.