Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) DGS8: sc-404631-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DGS8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DGS8 Double Nickase (h) et le plasmide DGS8 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DGCR8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DGS8 Antibody (E-10): sc-377249
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DGS8 | sc-404631-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DGS8 | sc-404631-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DGCR8 (DGS8) code un composant essentiel du complexe nucléaire « Microprocessor », qui s’associe à DROSHA pour reconnaître et cliver les transcrits primaires de microARN en pré‑miARN, façonnant ainsi la biogenèse globale des miARN. Par ce rôle, DGCR8 influence des programmes de régulation génique post‑transcriptionnelle qui contrôlent la progression du cycle cellulaire, la différenciation et les réponses au stress. Les voies miARN dépendantes de DGCR8 recoupent la régulation de la chromatine et des réseaux de signalisation qui ajustent l’engagement de lignée et l’homéostasie de l’ARN. Des altérations de la dose ou de la fonction de DGCR8 ont été associées à des profils de miARN dérégulés et sont étudiées dans le contexte de mécanismes pathologiques neurodéveloppementaux et prolifératifs.
DGS8 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DGCR8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DGCR8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DGCR8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DGCR8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.