Plasmide Double Nickase (h) Derlin-2: sc-408875-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Derlin-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Derlin-2 Double Nickase (h) et le plasmide Derlin-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DERL2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Derlin-2 Antibody (D-10): sc-398573
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Derlin-2 | sc-408875-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Derlin-2 | sc-408875-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **DERL2** code la **Derlin-2**, une protéine membranaire du réticulum endoplasmique (RE) à passages multiples qui intervient dans la dégradation associée au RE (ERAD) en facilitant la rétrotranslocation de protéines luminales et membranaires mal repliées vers le système ubiquitine–protéasome. Derlin-2 agit de concert avec p97/VCP, des ligases ubiquitine et des adaptateurs associés afin de maintenir la protéostasie au cours de la réponse aux protéines mal repliées et de limiter la signalisation du stress du RE. Par son rôle dans le contrôle qualité des protéines sécrétées et membranaires, **DERL2** influence des voies liées à l’adaptation au stress cellulaire, à l’inflammation et au traitement des antigènes. Une capacité ERAD dérégulée et un stress chronique du RE sont impliqués dans des modèles de cancers, de neurodégénérescence et de maladies métaboliques, ce qui fait de **DERL2** un nœud pertinent pour des études mécanistiques de phénotypes dépendants de la protéostasie.
Derlin-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DERL2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DERL2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DERL2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DERL2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.