DEPDC5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402806-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DEPDC5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DEPDC5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DEPDC5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DEPDC5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DEPDC5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402806-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DEPDC5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402806-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DEPDC5 (DEP domain containing 5) codifica um componente central do complexo GATOR1, um regulador negativo da sinalização do mTORC1 a jusante da detecção de aminoácidos na superfície lisossomal. Ao atuar como um fator ativador de GTPase (GAP) sobre as GTPases Rag, o DEPDC5 ajuda a conter a atividade do mTORC1 induzida por nutrientes, influenciando assim a autofagia, a síntese proteica e o controle do crescimento celular. A disfunção do DEPDC5 tem sido associada à desregulação da sinalização da via mTOR e à excitabilidade neuronal alterada, com associações genéticas relatadas em epilepsias focais e malformações corticais. Essas propriedades tornam o DEPDC5 um alvo útil para estudos mecanísticos da regulação do mTORC1, do crosstalk da sinalização metabólica e de perturbações de vias do neurodesenvolvimento.
DEPDC5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DEPDC5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DEPDC5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DEPDC5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DEPDC5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.