Deltex-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420429
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Deltex-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Deltex-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Deltex-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420429 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Dtx1 codifica a Deltex-1, uma ligase de ubiquitina E3 que atua como moduladora dependente do contexto da sinalização de Notch, influenciando complexos de sinalização próximos ao receptor e a renovação (turnover) de componentes da via. Por meio de regulação dependente de ubiquitina, a Deltex-1 pode moldar saídas transcricionais que afetam decisões de destino celular, programas de diferenciação e a homeostase de células imunes em modelos murinos. A atividade de Dtx1 tem sido associada a vias que controlam a proteostase e a transdução de sinais, incluindo comunicação cruzada com programas inflamatórios associados ao NF-κB em determinados contextos celulares. A desregulação da sinalização Notch/ubiquitina envolvendo a Deltex-1 tem sido estudada em disfunções imunes e processos oncogênicos, tornando Dtx1 um nó útil para dissecar, mecanisticamente, fenótipos dependentes de via.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Deltex-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Dtx1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Dtx1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Dtx1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Deltex-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Dtx1 para a investigação da sinalização de Deltex-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Dtx1 críticos para a função Deltex-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Dtx1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Deltex-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Deltex-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Dtx1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Deltex-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Deltex-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Dtx1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Dtx1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.