Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO DEDD (m): sc-423450
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- DEDD Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique DEDD, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DEDD Antibody (H-4): sc-271192
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO DEDD (m) | sc-423450 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Dedd code la protéine DEDD (Death Effector Domain-Containing DNA-Binding protein), un régulateur de l’apoptose et de programmes transcriptionnels liés à la signalisation des caspases. Il a été rapporté que DEDD s’associe au nucléole et à la chromatine, reliant les voies des récepteurs de mort à des mécanismes effecteurs en aval et au contrôle, lié au cycle cellulaire, de l’expression génique. Dans des modèles murins, la perturbation de Dedd peut influencer l’équilibre entre survie et mort cellulaire programmée, des processus centraux pour l’homéostasie immunitaire et le remodelage tissulaire. Une apoptose dérégulée et une signalisation de réponse au stress impliquant DEDD sont pertinentes pour l’étude des maladies inflammatoires, des affections neurodégénératives et de la biologie des cancers, où des décisions de destin cellulaire altérées contribuent aux phénotypes pathologiques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO DEDD (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Dedd dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Dedd, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Dedd à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine DEDD.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Dedd pour l'étude de la signalisation de DEDD, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Dedd essentiels à la fonction de DEDD
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Dedd pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le DEDD plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le DEDD plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Dedd. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le DEDD plasmide HDR (m) et le DEDD (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Dedd pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Dedd définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.