Plásmido Doble Nickase (h) DDX37: sc-412866-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)DDX37 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa DDX37 (h) y el plásmido de doble nickasa DDX37 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DHX37. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) DDX37 | sc-412866-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) DDX37 | sc-412866-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DHX37 codifica la helicasa de ARN humana de tipo DEAD-box DDX37, una enzima nucleolar que remodela complejos ARN–proteína durante la biogénesis de ribosomas y el procesamiento del pre-ARNr. DDX37 participa en pasos de desenrollamiento de ARN dependientes de ATP necesarios para la maduración de la subunidad pequeña, lo que vincula su actividad con la homeostasis nucleolar, la capacidad de traducción y la progresión del ciclo celular. La alteración del ensamblaje ribosomal mediado por helicasas de ARN puede activar señales de estrés nucleolar y provocar cambios amplios en el transcriptoma y el proteoma. DHX37 se ha implicado en trastornos del desarrollo gonadal y también es de interés en contextos de biología del cáncer, donde las vías de biogénesis ribosomal y procesamiento de ARN se reconfiguran con frecuencia.
DDX37 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DHX37 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DHX37. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DHX37. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DHX37 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.