Dcun1D4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-409238

概要

DCUN1D4はDcun1D4をコードしており、Dcun1D4はDCN1様ファミリーの一員で、カリリンのネディル化（NEDD8付加）を制御することを通じて、cullin-RING型E3ユビキチンリガーゼ（CRL）の活性調節に関与すると考えられています。Dcun1D4は、NEDD8依存的なカリリン複合体の活性化を調節することで、ユビキチン介在性のプロテオスタシス、細胞周期の進行、ならびに基質の適時なターンオーバーに依存するシグナル伝達経路に影響を及ぼし得ます。ネディル化―ユビキチン軸における活性の変化は、ゲノム安定性やストレス応答プログラムと広く関連するため、DCUN1D4はCRL依存プロセス全体にわたる経路特異性を検討するうえで有用な遺伝子座です。ユビキチン化およびネディル化機構の破綻は複数の疾患状況で観察されており、細胞恒常性や経路攪乱の観点からDCUN1D4の機構研究を進める根拠となります。

Dcun1D4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDCUN1D4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DCUN1D4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DCUN1D4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Dcun1D4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Dcun1D4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DCUN1D4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Dcun1D4の機能に不可欠なDCUN1D4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DCUN1D4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Dcun1D4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDcun1D4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DCUN1D4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Dcun1D4 HDRプラスミド（h）および Dcun1D4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDCUN1D4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDCUN1D4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。