CYP4F8 Lentiviral Activation Particles (h): sc-411598-LAC

CYP4F8 kodiert eine Cytochrom-P450-Monooxygenase, die die NADPH-abhängige Oxidation endogener Lipide und Xenobiotika katalysiert und damit zur Homöostase zellulärer Lipidmediatoren beiträgt. Als Bestandteil der CYP4-Familie unterstützt CYP4F8 oxidative Stoffwechselwege, die Entzündungs- und Signalprozesse durch Hydroxylierung von Fettsäuren und verwandten Eicosanoid-Substraten modulieren. Unterschiede in der Aktivität von CYP4F-Genen können die lokalen Konzentrationen bioaktiver Lipidmediatoren beeinflussen und verknüpfen diese Achse mit Studien zur Entzündungsbiologie, zur Epithelfunktion und zu hormonresponsiven Geweben. Entsprechend wird CYP4F8 häufig in mechanistischen Arbeitsabläufen untersucht, die auf lipidomische Regulation, Detoxifikationsreaktionen und krankheitsassoziierte Veränderungen der Expression metabolischer Enzyme fokussiert sind.

CYP4F8 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CYP4F8-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CYP4F8 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CYP4F8-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CYP4F8-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CYP4F8-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.