Cyp4f15 Lentiviral Activation Particles (m): sc-430669-LAC

Cyp4f15 kodiert eine Cytochrom‑P450‑Monooxygenase der Maus aus der CYP4F‑Familie, die die ω‑Hydroxylierung von Fettsäuren und Lipidmediatoren katalysiert. Durch die Regulation des Umsatzes von Eicosanoiden und verwandten Signallipiden beeinflussen CYP4F‑Enzyme entzündliche Signalwege, den oxidativen Stoffwechsel und die Lipidhomöostase. Eine veränderte CYP4F‑Aktivität kann lokale Konzentrationen bioaktiver Lipide verschieben und verbindet diese enzymatische Achse mit Studien zur Immunregulation, zum hepatischen und intestinalen Stoffwechsel sowie zu Gewebestress‑Antworten. Cyp4f15 dient daher als nützlicher Ansatzpunkt, um Lipidmediator‑Netzwerke und xenobiotika‑responsive Stoffwechselprogramme in Mausmodellen zu analysieren.

Cyp4f15 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Cyp4f15-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Cyp4f15 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Cyp4f15-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Cyp4f15-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Cyp4f15-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.