CYP2J6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-419921
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- CYP2J6 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im CYP2J6-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CYP2J6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-419921 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Cyp2j6 kodiert das Cytochrom-P450-Enzym CYP2J6, eine mit dem endoplasmatischen Retikulum assoziierte Monooxygenase, die den oxidativen Stoffwechsel endogener Lipide und Xenobiotika katalysiert. Enzyme der CYP2J-Familie tragen zur Epoxygenase-Aktivität gegenüber Arachidonsäure bei und erzeugen Epoxyeicosatriensäuren, die inflammatorische Signalwege, den Gefäßtonus und zelluläre Stressantworten modulieren. Über seine Funktionen im Redoxgleichgewicht und in der Homöostase von Lipidmediatoren kann Cyp2j6 Signalwege beeinflussen, die mit hepatischem und extrahepatischem Stoffwechsel, Immunregulation und der Anfälligkeit für toxikantinduzierte Gewebeschädigungen verknüpft sind. Veränderte P450-abhängige Lipidsignalisierung wird in Mausmodellen häufig genutzt, um Mechanismen zu untersuchen, die für kardiometabolische Dysfunktion und die Biologie entzündlicher Erkrankungen relevant sind.
Das CYP2J6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Cyp2j6-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Cyp2j6-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Cyp2j6 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CYP2J6-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Cyp2j6-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CYP2J6-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Cyp2j6-Exone abzielen, die für die CYP2J6-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Cyp2j6-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom CYP2J6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom CYP2J6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Cyp2j6-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CYP2J6 HDR-Plasmid (m) und CYP2J6 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Cyp2j6-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Cyp2j6-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.