CYP2A13 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403450

概要

CYP2A13は、外来性化合物および内因性基質の酸化的代謝に主として関与するヒトのシトクロムP450モノオキシゲナーゼをコードします。第I相薬物代謝酵素ネットワークの一員として、CYP2A13はシトクロムP450還元酵素との間でNADPH依存的な電子移動に関与し、細胞のレドックスバランスや反応性代謝物の生成に影響する反応を触媒します。本遺伝子は呼吸器系組織で高発現しており、吸入化合物の生体内活性化および解毒に関与することから、その活性は肺上皮のストレス応答に関連する経路と結び付けられています。CYP2A13の発現量や活性の違いは、外来性化合物の処理能や化学物質誘発性の組織障害に対する感受性の個人差と関連づけられており、毒性学および発がん研究モデルにおける重要性を支持します。

CYP2A13 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCYP2A13遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CYP2A13内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CYP2A13のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CYP2A13タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CYP2A13シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CYP2A13欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CYP2A13の機能に不可欠なCYP2A13エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CYP2A13ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CYP2A13 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCYP2A13 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CYP2A13遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CYP2A13 HDRプラスミド（h）および CYP2A13 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCYP2A13ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCYP2A13標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。