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CYP19慢病毒激活颗粒(h) | sc-400604-LAC | 200 µl | $455.00 |
人类 CYP19A1 基因编码芳香化酶(aromatase,CYP19),这是一种位于内质网的细胞色素 P450 酶,可通过将雄激素转化为雌激素来催化雌激素生物合成的最后一步。CYP19A1 通过调控局部与全身雌二醇的产生,进而调节类固醇激素信号网络,影响生殖生物学、脂肪组织功能、骨稳态以及神经内分泌调控。其活性与类固醇生成通路及下丘脑–垂体–性腺轴的反馈调节相整合,从而塑造由雌激素受体介导的转录程序。CYP19A1 表达或芳香化酶活性失调与多种激素依赖性表型相关,常见研究情境包括乳腺与子宫内膜肿瘤生物学、多囊卵巢综合征,以及芳香化酶活性过高或缺乏综合征等。
CYP19 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CYP19A1 表达。
CYP19 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CYP19A1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CYP19表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CYP19A1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。