cyclin Y CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-426856

Übersicht

Das Mausgen **Ccny** kodiert Cyclin Y, ein membranassoziiertes Cyclin, das zellzyklusgekoppelte Signalprozesse mit Entwicklungs- und Stoffwechselprogrammen koordiniert. Cyclin Y wird mit der Regulation der CDK-Aktivität in Verbindung gebracht und soll die Modulation des Wnt/β‑Catenin-Signalwegs unterstützen, indem es Signal-Komponenten an der Plasmamembran kontrolliert; dadurch beeinflusst es Proliferation, Differenzierung und Gewebehomöostase. Die **Ccny**-Expression und die durch Cycline gesteuerte Signaldynamik werden in Kontexten wie dem Verhalten von Stamm-/Vorläuferzellen, der neuronalen Entwicklung und dem Gewebeumbau untersucht, in denen eine dysregulierte Zellzykluskontrolle und Wnt-Signalisierung häufige Merkmale sind. Daher sind **Ccny**-Loss-of-Function-Modelle nützlich, um die cyclinabhängige Checkpoint-Regulation, das Zusammenspiel von Signalwegen (Pathway-Crosstalk) und Phänotypen zu analysieren, die für die Krebsbiologie und die neuroentwicklungsbezogene Forschung relevant sind.

Das cyclin Y CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Ccny-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Ccny-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Ccny nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die cyclin Y-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Ccny-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der cyclin Y-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Ccny-Exone abzielen, die für die cyclin Y-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Ccny-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom cyclin Y CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom cyclin Y CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Ccny-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das cyclin Y HDR-Plasmid (m) und cyclin Y HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Ccny-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Ccny-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.