Plasmide Double Nickase (m) cyclin M1: sc-429932-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) cyclin M1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide cyclin M1 Double Nickase (m) et le plasmide cyclin M1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cnnm1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) cyclin M1 | sc-429932-NIC | 20 µg | $410.00 |
Cnnm1 code la cycline M1, un régulateur conservé associé à la membrane du transport des cations divalents, qui contribue à l’homéostasie cellulaire du magnésium et à la signalisation dépendante des ions. En contrôlant les niveaux intracellulaires de Mg²⁺, la cycline M1 peut influer sur l’activité enzymatique dépendante de l’ATP, la signalisation des kinases et des processus métaboliques sensibles à la disponibilité en magnésium. Dans les systèmes murins, la fonction de Cnnm1 est pertinente pour l’étude de la gestion des électrolytes et des réponses au stress cellulaire, et un déséquilibre des cations a été associé à des phénotypes affectant les tissus excitables et la physiologie rénale. Ces caractéristiques font de Cnnm1 une cible utile pour disséquer les voies de transport ionique et les réseaux de signalisation en aval dans des modèles de recherche biomédicale.
cyclin M1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cnnm1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cnnm1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cnnm1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cnnm1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.