Plasmide Double Nickase (h) cyclin G2: sc-403620-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) cyclin G2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide cyclin G2 Double Nickase (h) et le plasmide cyclin G2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCNG2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: cyclin G2 Antibody (1F9-C11): sc-293302
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) cyclin G2 | sc-403620-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) cyclin G2 | sc-403620-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCNG2 code pour la cycline G2, une cycline atypique fréquemment induite par des signaux inhibiteurs de croissance et qui contribue à la régulation négative de la progression du cycle cellulaire, en particulier autour de la transition G1/S. La cycline G2 s’inscrit dans des voies de signalisation sensibles au stress et peut moduler le contrôle des points de contrôle (checkpoints) et la prolifération cellulaire via des interactions qui influencent l’activité des phosphatases et des voies dépendantes de la phosphorylation. Une expression altérée de CCNG2 a été associée à une dérégulation des programmes de prolifération et de différenciation, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de la biologie tumorale, de l’homéostasie tissulaire et de la suppression de croissance dépendante du contexte. Son rôle régulateur la relie également à des réponses cellulaires telles que la sénescence et l’adaptation au stress génotoxique ou métabolique.
cyclin G2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCNG2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCNG2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCNG2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCNG2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.