CXX1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406246

Panoramica

FAM127A codifica la proteina umana CXX1, un fattore ancora poco caratterizzato implicato in processi nucleari e nella regolazione dello stato cellulare. Le evidenze disponibili suggeriscono che CXX1 possa partecipare a funzioni associate alla cromatina e al controllo trascrizionale, collegandola a vie che influenzano proliferazione, risposte allo stress e programmi di differenziamento. Un’espressione alterata di FAM127A è stata riportata in dataset genomici e trascrittomici in diversi contesti patologici, a supporto del suo valore come bersaglio di ricerca per indagare i meccanismi di regolazione genica e i fenotipi di fitness cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO CXX1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FAM127A in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FAM127A insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FAM127A a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina CXX1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FAM127A per lo studio della segnalazione di CXX1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni FAM127A critici per la funzione di CXX1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FAM127A per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal CXX1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal CXX1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FAM127A. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal CXX1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR CXX1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FAM127A per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FAM127A definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.